Что такое экспрессия рецепторов в медицине
Что такое экспрессия рецепторов в медицине
Важной составляющей здоровья женщины является нормальное функционирование ее репродуктивной системы. К сожалению, число бесплодных браков не имеет тенденции к снижению. В настоящее время установлено, что решающую роль в имплантации играет количество функционально полноценных рецепторов ткани эндометрия к соответствующим стероидным гормонам [5]. При этом эстрадиол повышает концентрацию рецепторов эстрадиола (РЭ) и прогестерона (РП) в цитолизе клеток, а прогестерон её снижает. В ходе нормального менструального цикла имеются широкие индивидуальные колебания содержания РЭ и РП в эндометрии. Максимальное количество РЭ и РП в эндометрии отмечается в овуляторный период, а в секреторную фазу их количество уменьшается [7, 8].
Патология синтеза рецепторов в матке может происходить под влиянием изменения количества и соотношения половых гормонов, поражения патологическим процессом матки, дисбаланса других гормонов [14].
Нарушение экспрессии рецепторов стероидных гормонов является ведущим в формировании гиперпластических процессов эндометрия и миомы матки. От состояния рецепторного аппарата матки и уровня сывороточных гормонов зависит также эффект от применяемой гормональной терапии вплоть до полной нечувствительности к ней.
Эстрогены и прогестерон обладают способностью взаимодействовать и с клетками системы макрофагов за счет присутствующих на их плазматической мембране рецепторов к стероидным гормонам [13].
Активация макрофагальных клеток сопровождается усилением экспрессии клеточных рецепторов [1, 4, 10]. В клетках при этом увеличивается количество первичных и вторичных лизосом, повышается активность лизосомных ферментов, изменяется стабильность лизосомных мембран [9].
Цель работы – определить процесс активации моноцитов крови и перитонеальных макрофагов по уровню синтеза и секреции ими лизосомного фермента лизоцима, показателю стабильности лизосомных мембран этих клеток у женщин с разной степенью экспрессии эстрогеновых и прогестероновых рецепторов на клетках эндометрия в разные фазы маточного цикла.
Материалы и методы исследования
Исследованы моноциты крови и перитонеальные макрофаги у 63-х женщин репродуктивного возраста (30,5 ± 2,5 года), находившихся на лечении в КГБУЗ «Владивостокская клиническая больница № 1» и КГБУЗ «Владивостокский клинический родильный дом № 3» с трубно-перитонеальной формой бесплодия. Всем женщинам с диагностической целью проведены гистероскопия и выскабливание полости матки на 10-й или 21-й день менструального цикла в зависимости от времени поступления в стационар. Фаза маточного цикла определялась после гистологического исследования препарата в КГБУЗ «Владивостокское патологоанатомическое бюро». На все обследования пациентками получено информированное согласие.
По данным результатов гистологического исследования женщины разделены на две группы: пациентки, у которых эндометрий находился в фазе пролиферации (первая группа – 31 женщина) и в фазе секреции (вторая группа – 32 женщины). Выделение моноцитов крови проводилось на градиенте плотности фиколл-верографина центрифугированием крови в течение 30 минут при 400 G с последующим отсасыванием микропипеткой кольца градиента [11]. Клетки прикреплялись к поверхности стекла в течение 60 минут при температуре 37 °С. Перитонеальные макрофаги получали из суспензии, взятой методом пункций заднего влагалищного свода в день проводимой гистероскопии, также выделяли прикреплением клеток к поверхности стекла.
Концентрацию клеток считали в камере Горяева и доводили стерильным физиологическим раствором до 6∙106 кл /мл. Определение стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов с расчетом показателя стабильности (ПСЛМ) проводили методом культивирования выделенных клеток в среде 199 с добавлением 0,5 % стерильного L-глутамина и 2,5 % смешанной человеческой сыворотки, прогретой в течение 30 мин при 56 °С в течение 12–15 часов при 37 °С. Микрометодом проводили определение секретированного лизоцима (Lсекр), а после 4-6-кратного замораживания-оттаивания культивируемых клеток – общего лизоцима (Lобщ = Lсекретированный + Lвнутриклеточный) [3]. На основании полученных результатов секретированного и общего лизоцима высчитывали ПСЛМ по формуле ПСЛМ = Lсекр/Lобщ∙100 %. Повышение ПСЛМ выше оптимального значения (53–58 %) расценивалось как лабилизация лизосомных мембран, снижение этого показателя – как стабилизация мембран. По результатам оценки разницы Lобщ после и до культивирования определяли количество синтезированного лизоцима (Lсинт) [12].
Определение экспрессии рецепторов к эстрогенам и прогестерону проводили иммуногистохимическим методом с использованием моноклональных антител (Dako, США) [2]. Производилась заливка фиксированных кусочков ткани эндометрия в парафин и делались тонкие срезы толщиной 4–5 мкм с помещением их по 3–4 образца на предметные стекла, покрытые поли-L-лизином. Выявление тканевых антигенов проводили авидин-биотиновым методом, в котором биотилированные вторичные антитела взаимодействуют с соответствующими молекулами пероксидазно-конъюгированного стрептавидина.
Нагревали стекла со срезами, после чего гистологические препараты обрабатывали первичными иммунными сыворотками, содержащими мышиные моноклональные антитела соответственно к рецепторам эстрогенов (Э) и прогестерону (П). На каждом стекле 1 срез (контрольный) обрабатывали неиммунной мышиной сывороткой («Dako», USA). В качестве вторичных сывороток использовали антимышиные биотилированные антитела козы (ИМТЕК, Россия) в концентрации 1:100 и конъюгированную со стрептовидином полипероксидазу (ИМТЕК, Россия) в концентрации 1:100. Анализ окрашенных пероксидазным методом ядер производили при увеличении объектива х40. Среднюю интенсивность иммуногистохимической реакции оценивали по 4-бальной шкале на 100 клеток: 0 – отсутствие реакции, 1 – слабая реакция, 2 – умеренная реакция, 3 – сильная реакция
Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием пакета программ «Statistica 6» с применением стандартных методов вариационной статистики и критерия Манна‒Уитни для оценки статистически значимых различий. Различие считалось достоверным при р Примечания: (достоверность различия между сравниваемыми группами):
** – различие значимо p Примечания: (достоверность различия между сравниваемыми группами)
*** – различие значимо p Примечания: (достоверность различия между сравниваемыми группами)
** – различие значимо p Примечания: (достоверность различия между сравниваемыми группами)
* – различие незначимо p > 0,05;
*** – различие значимо p 0,05). С усилением экспрессии рецепторов к прогестерону происходит значительное снижение ПСЛМ макрофагальных клеток (p Примечания: (достоверность различия между сравниваемыми группами)
Определение экспрессии PR, ER, Ki67, HER-2 при раке молочной железы
Рак молочной железы – злокачественная опухоль железистой ткани молочной железы, является ведущей онкологической патологией у женщин. По данным Всемирной Организации Здравоохранения каждая восьмая женщина рискует заболеть этой патологией, независимо от возраста. Ежегодно в мире регистрируется от 800 тыс. – до 1 млн. новых случаев рака молочной железы (ВОЗ).
В настоящее время заболеваемость раком молочной железы возрастает в связи с проведением маммографического скрининга и общего старения населения (по данным European Society For Medical Oncology).
PR – рецептор к прогестерону.
ER – рецептор к эстрогену.
Ki67 – онкогенный белок.
HER-2 – Рецептор второго типа к человеческому эпидермальному фактору роста (human epidermal growth factor receptor 2).
Опухоли молочной железы являются гормонозависимыми опухолями. Эстроген и прогестерон оказывают стимулирующее действие на рост опухоли молочной железы. Белок Ki 67 является показателем пролиферативной активности опухолевых клеток. Повышенная экспрессия HER-2 характеризуется усилением пролиферации клеток, уменьшением количества рецепторов эстрогенов в опухоли, снижением эффективности химио- и гормонотерапии, таким образом, служит маркером неблагоприятного прогноза и повышенного риска рецидива заболевания.
На основании иммуногистохимического исследования (ИГХ) выделяют 4 подтипа рака молочной железы. Каждый подтип имеет свои особенности клинической картины, прогноз и тактику лечения.
Известно, что люминальные типы РМЖ имеют менее агрессивное течение и благоприятный прогноз по сравнению с HER-2 положительным и трижды негативным РМЖ. Особо обращает на себя внимание трижды негативный рак молочной железы (отрицательные РЭ, РП, HER2), который отличается агрессивным течением, ранним появлением метастазов и неблагоприятным прогнозом.
Молекулярно-биологические подтипы рака молочной железы
Определение в опухоли молочной железы экспрессии РЭ, РП, HER2 и Кi 67 является обязательным при диагностике РМЖ. Данное исследование включено в алгоритм диагностики и лечения рака молочной железы.
В заключении об исследовании должна содержаться информация не только о процентном содержании клеток, положительных по РЭ и РП, но и об интенсивности окрашивания. При сомнительном результате ИГХ исследования экспрессии HER2, рекомендуется проводить определение амплификации гена HER2 методом гибридизации in situ (FISH). (Согласно Практическим рекомендациям по лекарственному лечению инвазивного рака молочной железы, 2019 г.).
Для интерпретации результатов иммуногистохимического исследования рецепторного статуса опухоли молочной железы применяется шкала Allred, с помощью которой оценивается количество клеток, с рецепторами гормонов и интенсивность окрашивания при определении рецепторов. В данной шкале процент положительных клеток оценивается от 0 до 5 баллов, а интенсивность окрашивания от 0 до 3.
Показания к исследованию:
Определение экспрессии PR, ER, Ki67, HER-2 при раке молочной железы используется для выбора тактики назначения адъювантной терапии.
Адъювантная терапия – лекарственная терапия, которая назначается в дополнение к хирургическому и лучевому методам лечения и направлена на снижение риска рецидива болезни.
План адъювантной лекарственной терапии основывается на принадлежности опухоли к одному из молекулярно-биологических подтипов и стадии заболевания.
Что такое экспрессия рецепторов в медицине
ГОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», Белгород, Россия
Белгородский государственный национальный исследовательский университет
ОГУЗ «Белгородский областной кожно-венерологический диспансер», Белгород, Россия
Белгородский государственный национальный исследовательский университет
Кафедра медико-биологических дисциплин Белгородского государственного национального исследовательского университета
ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Новосибирск, Россия
Роль экспрессии Толл-подобных рецепторов в рецидивировании генитального герпеса
Журнал: Проблемы репродукции. 2014;(2): 23-26
Селиверстова М. С., Лебедева О. П., Тарасова Т. К., Пахомов С. П., Чурносов М. И., Архипов С. А. Роль экспрессии Толл-подобных рецепторов в рецидивировании генитального герпеса. Проблемы репродукции. 2014;(2):23-26.
Seliverstova M S, Lebedeva O P, Tarasova T K, Pakhomov S P, Churnosov M I, Arkhipov S A. The role of Toll-like receptors expression in the recurrent genital herpes. Russian Journal of Human Reproduction. 2014;(2):23-26.
ГОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», Белгород, Россия
ГОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», Белгород, Россия
Белгородский государственный национальный исследовательский университет
ОГУЗ «Белгородский областной кожно-венерологический диспансер», Белгород, Россия
Белгородский государственный национальный исследовательский университет
Кафедра медико-биологических дисциплин Белгородского государственного национального исследовательского университета
ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Новосибирск, Россия
По данным ВОЗ на ноябрь 2013 г., более 530 млн человек в мире заражены вирусом генитального герпеса (ГГ) [10]. ГГ способен вызывать самопроизвольные выкидыши, преждевременные роды, синдром задержки роста плода, врожденные пороки развития, неонатальный сепсис, энцефалит и менингоэнцефалит у новорожденного [5].
Одной из главных проблем является рецидивирующая форма ГГ. По данным литературы [1], более чем у 20-30% больных ГГ в течение первых 2-3 лет развивается рецидив. Рецидивирующая форма ГГ оказывает не только негативное влияние на психоэмоциональный статус пациентов, но и отражает несостоятельность местного противовирусного ответа [9]. В частности, наличие рецидивирующего ГГ в последнее время связывают с повышенным риском заражения ВИЧ [8].
Материал и методы
Результаты и обсуждение
Обнаружено снижение экспрессии TLR7 в группе пациентов с редко рецидивирующей формой ГГ в сравнении с пациентами с первым эпизодом непервичной инфекции [7,62 (5,98; 10,3) против 11,67 (7,36; 20,04) соответственно; p 
Это соотносится с данными литературы [11], согласно которым снижение экспрессии TLR3 и TLR7 связано с повышением восприимчивости к HSV. В исследовании K. Yang [12] также было отмечено, что при дефиците IRAK4 продукция цитокинов не всегда может быть эффективной, что, вероятно, приводит к рецидивам ГГ. В частности, продукция IFN посредством активации TLR7 и TLR9 осуществляется только через IRAK4 и соответственно при дефиците IRAK4 не может быть полноценной. С другой стороны, IRAK4-дефицитные пациенты могут контролировать противовирусную защиту посредством TLR3/4-зависимой продукции IFN. В нашем исследовании у пациенток с редко рецидивирующей формой ГГ снижена экспрессия TLR7 и IRAK4 по сравнению с пациентками с первым эпизодом непервичной инфекции, а также снижена экспрессия TLR3 в группе с часто рецидивирующей формой в сравнении с группой с редко рецидивирующим ГГ, но нет изменений экспрессии TLR4 и TLR9. Возможно, именно такой профиль характерен для пациенток этих групп.
Для выявления корреляционных взаимосвязей между экспрессией TLRs и белков их сигнального пути использовали критерий Спирмена. Умеренная положительная корреляционная связь наблюдалась только между экспрессией мРНК TRIF и TLR3 (R=0,37; p 
Выявлена умеренно положительная корреляционная связь между экспрессией большинства TLRs (табл. 3). 
TLR2, TLR3, TLR4, TLR7, TLR8, TLR9 комплексно участвуют в распознавании лигандов HSV, имеют общий MyD88-зависимый путь активации. Исключение составляют TLR3, которому необходима адапторная молекула TRIF, и TLR4, который может активироваться и посредством MyD88, и TRIF [7]. Как видно из табл. 3, корреляционная связь при HSV есть практически между всеми TLRs, независимо от дальнейшего пути активации [6].
Кроме того, обнаружена слабая положительная корреляционная связь между экспрессией TLR7 и IRAK4 (R=0,22; p 
Несмотря на то что TLR7 и TLR9 имеют разные лиганды, они оба располагаются внутриклеточно, имеют общий MyD88-зависимый сигнальный путь и продукция IFN посредством их активации осуществляется только через IRAK4 [12].
В клинической картине наблюдалась умеренная положительная корреляционная связь между экспрессией TLR2 (R=0,33; p 
Таким образом, особенности клинической картины при ГГ в большей степени коррелируют с экспрессией TLRs, лигандами которых являются бактериальные антигены.
Также обнаружена сильная положительная корреляционная связь между наличием у женщин в анамнезе хламидийной инфекции и количеством обострений ГГ (R=0,74; p
Экспрессия рецепторов соматостатина в адренокортикальных карциномах
Полный текст:
Аннотация
Обоснование. Адренокортикальный рак (АКР) — редкая злокачественная опухоль с ежегодной заболеваемостью 0,5—2 случая на 1 млн населения. Основным методом лечения АКР является хирургический. Если из-за распространения или прогрессирования опухоли ее полное удаление невозможно, используют митотан (o,p’DDD). При этом стабилизация и частичный эффект (по критериям RECIST) отмечен только в 48,7% случаев, что обусловливает необходимость поиска новых терапевтических мишеней.
Цель исследования — оценить экспрессию рецепторов соматостатина в адренокортикальных карциномах и опухолях коры надпочечника с неопределенным потенциалом злокачественности.
Материал и методы. Использован операционный материал опухолей коры надпочечников от 13 пациентов (4 мужчин и 9 женщин, в возрасте от 28 до 68 лет). Во всех случаях диагноз был верифицирован морфологически и иммуногистохимически (ИГХ): в 10 случаях имел место АКР (в 1 из них — метастаз АКР в печень), в 1 — онкоцитарный вариант АКР и в 2 — онкоцитома с неопределенным потенциалом злокачественности. Морфологическая оценка АКР проводилась в соответствии с критериями Weiss (для опухолей АКР) и Lin—Weiss—Bisceglia (для онкоцитарных новообразований коры надпочечников). ИГХ-исследование было выполнено с антителами к спектру тканеспецифических для надпочечника маркеров, а также Кi-67 и рецепторам к соматостатину 2-го и 5-го подтипов (РССТ2 и РССТ5).
Результаты. Экспрессия РССТ2 и/или РССТ5 была выявлена в 8 (61,5%) из 13 случаев АКР. Изолированная экспрессия РССТ2 отмечена в 4 случаях из 13, а РССТ5 — в 6 из 10, в 2 из 10 случаев наблюдалась кoэкспрессия рецепторов обоих типов. Экспрессия РССТ наблюдалась как в АКР, так и в метастазе АКР в печень, а также в онкоцитарном варианте АКР.
Заключение. Экспрессия РССТ 2-го и/или 5-го подтипов в ткани АКР расширяет диагностические и прогностические возможности при данной патологии.
Ключевые слова
Для цитирования:
Воронкова И.А., Гуревич Л.Е., Бритвин Т.А., Кривошеев А.В., Мельниченко Г.А. Экспрессия рецепторов соматостатина в адренокортикальных карциномах. Проблемы Эндокринологии. 2018;64(2):72-78. https://doi.org/10.14341/probl9319
For citation:
Voronkova I.A., Gurevch L.E., Britvin T.A., Krivosheev A.V., Mel’nichenko G.A. Somatostatin receptor expression in adrenocortical carcinomas. Problems of Endocrinology. 2018;64(2):72-78. https://doi.org/10.14341/probl9319
Адренокортикальный рак (АКР) — сравнительно редкая злокачественная опухоль коры надпочечника, характеризующаяся агрессивным клиническим течением и плохим лечебным прогнозом.
Гетерогенность морфологического строения АКР часто обусловливает диагностические ошибки. Ведущим методом лечения больных с АКР остается хирургический. Однако возможности хирургического лечения существенно ограничены в связи с поздним выявлением заболевания, когда распространенность опухолевого процесса соответствует III и IV стадиям. Частота рецидивирования после радикальных (R0) операций достигает 85%, а показатель общей выживаемости составляет всего 18—48% и в последние 10—15 лет не обнаруживает существенной тенденции к улучшению [1—3].
В качестве адъювантного лечения местно-распространенного АКР, а также в случаях диссеминированного опухолевого процесса применяют терапию митотаном [4, 5]. В России изучена эффективность митотана в 57 случаях АКР [6]. Стабилизация процесса и частичный эффект (по критериям RECIST) отмечены только у 48,7% больных; влияние терапии на продолжительность жизни больных не исследовалось.
Для лекарственной терапии АКР предложен и ряд таргетных препаратов, опосредующих свое действие через специфические рецепторы, однако их применение ограничивается сравнительно небольшим числом наблюдений и в целом низкой эффективностью [6, 7].
Таким образом, ограниченные возможности и сравнительно невысокая эффективность хирургического лечения АКР и предлагаемых лекарственных препаратов диктуют необходимость поиска новых путей улучшения результатов терапии пациентов с подобными новообразованиями. Одним из таких путей являются молекулярно-биологические и генетические исследования с целью выявления новых клеточных мишеней лекарственной терапии АКР.
В последние годы появились сообщения об экспрессии рецепторов к соматостатину (РССТ) в ткани АКР, а также о влиянии синтетических аналогов соматостатина на рост клеточных линий карциномы коры надпочечников in vitro [8, 9]. Имеющиеся данные, однако, неоднозначны, что и послужило основанием для проведения собственного исследования.
Цель исследования — оценить экспрессию РССТ 2-го и 5-го подтипов в АКР и образованиях коры надпочечников с неопределенным потенциалом злокачественности.
Материал и методы
Дизайн исследования
В обсервационное одномоментное неконтролируемое моноцентровое пилотное исследование были включены 13 пациентов 28—68 лет с опухолями коры надпочечников.
Критерии соответствия
В исследование включали пациентов старше 18 лет с гистологически подтвержденным диагнозом АКР или новообразованием коры надпочечников с неопределенным потенциалом злокачественности.
Критерии Lin—Weiss—Bisceglia для онкоцитарных новообразований коры надпочечников подразделяются на большие (более 5 митозов на 50 репрезентативных полей зрения, атипические митозы, инвазия вен) и малые (размер опухоли более 10 см и/или масса более 200 г, некрозы, инвазия капсулы, синусоидальная инвазия). Наличие одного из больших критериев свидетельствует о злокачественности, присутствие от 1 до 4 малых критериев — о неопределенном потенциале злокачественности [10—12].
Гистогенез опухолей был подтвержден с помощью иммуногистохимического (ИГХ) метода с использованием тканеспецифических маркеров: антител к мелану-А и ингибину-α. Для дифференциальной диагностики с новообразованиями нейроэндокринной природы проводили ИГХ-типи рование с антителами к синаптофизину и хромогранину А. В случаях изолированной экспрессии мелана-А для исключения первичной меланомы дополнительно проводили исследование с антителами к HMB-45 и тирозиназе.
Условия проведения
Морфологическая верификация диагноза с ИГХ-ис следованием была выполнена в патологоанатомическом отделении ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского. Оценка гистологических препаратов и ИГХ-реакции проводилась независимо двумя патологами с последующим обсуждением результатов и вынесением коллегиального заключения.
Продолжительность исследования
Исследование проводилось с 2016 по 2017 г.
Основной исход исследования
Основным исходом исследования считалось наличие или отсутствие экспрессии РССТ 2-го и/или 5-го подтипов в ткани новообразования коры НП.
Анализ в подгруппах
В соответствии с экспрессией РССТ2 или РССТ5 пациенты были разделены на подгруппы РССТ2+ и РССТ5+. В случаях сочетанной экспрессии РССТ2 и РССТ5 пациенты не выделялись в отдельную группу из-за малого количества наблюдений, а включались в каждую подгруппу.
Методы регистрации исходов
Оценка экспрессии рецепторов к соматостатину в опухолевых клетках проводилась по шкале M. Volante и соавт. [13]: 0 баллов — отсутствие экспрессии, 1 балл — только цитоплазматическое окрашивание, 2 балла — полное или частичное окрашивание мембраны до 50% опухолевых клеток (независимо от наличия цитоплазматического окрашивания) и 3 балла — полное мембранное окрашивание более 50% опухолевых клеток (независимо от наличия цитоплазматического окрашивания). Положительной считалась реакция в 2 и 3 балла (рис. 1, см. на цв. вклейке).
Рис. 1. Оценка экспрессии рецепторов к соматостатину в баллах в образованиях коры надпочечника. а — 3 балла: полное мембранное окрашивание более 50% опухолевых клеток (×400); б — 2 балла: мембранно-цитоплазматическое окрашивание, преимущественно неполная мембранная экспрессия в менее чем 50% опухолевых клеток (×400); в — 1 балл: окрашива- ние только цитоплазмы (×400); г — 0 баллов: отсутствие экспрессии (×400).
Оценка экспрессии и определение индекса Ki-67 проводились по стандартной методике (вычисляли среднее количество меченных этим маркером ядер из 100 ядер опухолевых клеток при учете 500 клеток в репрезентативных полях зрения при ув. 400).
ИГХ-исследование было проведено на автоматизированной системе Ventana Benech Ultra («Roche», Швейцария) по стандартным протоколам с антителами к мелану-А (клон A103; разведение 1:100; «CellMarque», США), ингибину-α (клон MRQ-63; разведение 1:100; «CellMarque», США), синаптофизину (клон MRQ-40; разведение 1:100; «CellMarque», США), хромогранину A (клон LK2H10; разведение 1:100; «CellMarque», США), Ki-67 (клон MIB-1; разведение 1:100; «Dako», Великобритания), РССТ2 (клон EP149; разведение 1:100; «Epitomics», США), РССТ5 (клон ID-UMB4, разведение1:100; «Epitomics», США) с использованием набора для визуализации REVEAL Biotin-FreePolyvalent DAB («Roche», Швейцария).
Этическая экспертиза
Все пациенты подписывали добровольное информированное согласие на использование биологического материала в научных целях и на обработку персональных данных. Протокол исследования одобрен этическим комитетом ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского от 15.12.16 (протокол заседания №10).
Статистический анализ
Принципы расчета размера выборки: размер выборки предварительно не рассчитывался.
Методы статистического анализа данных: использовалась программа Statistica for Windows v.12.0 («StatSoft Inc.», США). Количественные данные представлены в виде медианы (Ме), моды (Мо) и квартилей (25-й и 75-й процентили, Q25—75), качественные — в виде долей.
Сравнительный анализ двух независимых групп по количественному признаку проводили с помощью критерия Манна—Уитни, по качественному признаку — с использованием двустороннего точного критерия Фишера. Взаимосвязь изученных признаков определяли по коэффициенту корреляции Спирмена (rs). Статистически достоверными считались различия при р Kip1 ), гипофосфорилирования Rb, ингибирования циклина/cdk2 и гуанилилциклазы [24].
Агонисты соматостатина могут также влиять на ангиогенез в опухоли, подавляя выделение проангиогенных факторов и экспрессию соответствующих рецепторов, таких как сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF) и его рецептор-2 (VEGFR-2), фактор роста фибробластов (bFGF), гормон роста/инсулиноподобный фактор роста 1 (ИРФ-1) [24] и др.
Применение аналогов соматостатина при АКР как в виде монотерапии, так и в комбинации с другими препаратами рассматривалось многими авторами. C. Ziegler и соавт. [25] показали существенное влияние RC-160 (вапреотида) на рост и выживание опухолевых клеток в культуре SW-13 (митотан-нечувствительный АКР). Однако B. Mariniello и соавт. [8], изучив влияние пасиреотида (SOM 230) на клеточные линии АКР (первичная культура и линии SW13 и H295R), пришли к заключению, что аналог соматостатина подавляет гормональную продукцию клеток АКР, но не влияет на их жизнеспособность. В более поздней работе A. Germano и соавт. [9] с использованием клеточных линий АКР, чувствительных (H295R) и нечувствительных (SW13) к митотану, также не выявили влияния пасиреотида на жизнеспособность клеток АКР. В то же время митотан и пасиреотид синергично тормозили пролиферацию клеток линии SW13 (резистентных к митотану). Напротив, в митотан-чувствительной культуре (H295R) эти препараты препятствовали действию друг друга на рост клеток.
Ограничения исследования
Коллектив авторов допускает, что определенное влияние на доказательность полученных результатов оказал малый объем исследуемой выборки. Однако специфичность реакции с антителами к РССТ не позволяет сомневаться в качестве ИГХ-иссле дования и наличии РССТ, по крайней мере, в определенной части АКР.
Заключение
Подтверждено наличие РССТ в АКР и опухолях коры надпочечника с неопределенным потенциалом злокачественности и выявлено преобладание в них экспрессии РССТ5. Полученные данные могут служить основой для дальнейших исследований экспрессии РССТ в карциномах коры надпочечников с целью анализа ее взаимосвязи с морфологическими и иммуногистохимическими характеристиками опухолей и роли в прогнозе заболевания.
Дополнительная информация
Источник финансирования. Исследование выполнено при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант РНФ №15-15-30032).
Конфликт интересов: авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Участие авторов: проведение и оценка гистологического и иммуногистохимического исследований, обработка данных, написание текста, подготовка иллюстраций — Воронкова И.А., оценка гистологического и иммуногистохимического исследований, обработка и анализ полученных данных, написание и редактирование текста, подготовка иллюстраций — Гуревич Л.Е., сбор материала, обработка данных, анализ полученных данных, написание и редактирование текста — Бритвин Т.А., сбор материала, обработка данных, редактирование текста — Кривошеев А.В., концепция и дизайн исследования, анализ полученных данных, редактирование текста — Мельниченко Г.А.