Электрохемилюминесцентный иммуноанализ что это такое
Электрохемилюминесцентный иммуноанализ что это такое
Бета-субъединица хорионического гонадотропина человека – одна из субъединиц молекулы специфического гормона – хорионического гонадотропина, образующегося в оболочке человеческого эмбриона. Анализ проводят в целях ранней диагностики беременности, выявления ее осложнений и диагностики заболеваний, связанных с нарушением секреции ХГЧ.
Human Chorionic Gonadotropin, hCG, b-HCG, Quantitative hCG; Beta hCG, Total hCG, Total beta hCG.
Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA).
МЕ/л (международная единица на литр).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) – это гормон, который вырабатывается в плодной оболочке человеческого эмбриона. Он является важным показателем развития беременности и ее отклонений. Его производят клетки хориона (оболочки зародыша) сразу после его прикрепления к стенке матки (это происходит лишь через несколько дней после оплодотворения). Зародыш на этом этапе беременности представляет собой заполненный жидкостью микроскопический пузырек, стенки которого состоят из быстро размножающихся клеток. Из одной части этих клеток и развивается будущий ребенок (эмбриобласт), в то время как из клеток, находящихся снаружи зародыша, образуется трофобласт – та часть плодного яйца, с помощью которого оно прикрепляется к стенке матки. В дальнейшем из трофобласта образуется хорион.
Хорион выполняет функцию питания зародыша, являясь посредником между организмом матери и ребенка. Кроме того, он вырабатывает хорионический гонадотропин, который, с одной стороны, влияет на формирование ребенка, с другой – специфическим образом воздействует на организм матери, обеспечивая благополучное протекание беременности. Появление этого гормона в организме будущей матери на начальной стадии беременности и объясняет важность теста для ранней диагностики беременности.
Хорионический гонадотропин стимулирует секреторную функцию желтого тела яичников, которое должно продуцировать гормон прогестерон, поддерживающий нормальное состояние внутренней оболочки стенки матки – эндометрия. Эндометрий обеспечивает надежное прикрепление плодного яйца к организму матери и его питание всеми необходимыми веществами.
Благодаря достаточному количеству хорионического гонадотропина желтое тело, в норме существующее лишь около 2 недель в течение каждого менструального цикла, при успешном зачатии не подвергается рассасыванию и остается функционально активным в течение всего срока беременности. Причем именно у беременных под влиянием хорионического гонадотропина оно производит очень большие количества прогестерона. Кроме того, ХГ стимулирует продукцию эстрогенов и слабых андрогенов клетками яичников и способствует развитию функциональной активности самого хориона, а в дальнейшем и плаценты, которая образуется в результате созревания и разрастания хориональной ткани, улучшая ее собственное питание и увеличивая количество ворсин хориона.
Таким образом, роль хорионического гонадотропина заключается в специфическом и многостороннем воздействии на организм женщины и плода в целях успешного протекания беременности. На основании анализа на хорионический гонадотропин определяется присутствие в организме женщины хорионической ткани, а значит, и беременность.
По химическому строению хорионический гонадотропин является соединением белка и сложных углеводов, состоящим из двух частей (субъединиц): альфы и беты. Альфа-субъединица хорионического гонадотропина полностью идентична альфа-субъединицам лютеинизирующего, фолликулостимулирующего и тиреотропного гормонов гипофиза, которые выполняют функции, во многом сходные с функцией хорионического гонадотропина, но не при беременности. Бета-субъединица хорионического гонадотропина уникальна, что, с одной стороны, обуславливает специфичность его действия, а с другой – позволяет идентифицировать его в биологических средах. В связи с этим данный тест носит название «бета-субъединица хорионического гонадотропина (бета-ХГЧ)».
Зная уровень бета-ХГЧ в крови, можно уже на 6-8-й день после зачатия диагностировать беременность (в моче концентрация бета-ХГЧ достигает диагностического уровня на 1-2 дня позже). В норме при беременности в период между 2-й и 5-й неделей количество бета-ХГЧ удваивается каждые 1,5 суток. При многоплодной беременности оно увеличивается пропорционально числу плодов. Максимума уровень ХГЧ достигает на 10-11-ю неделю, а затем постепенно снижается. Это происходит в связи с тем, что с начала 2-й трети беременности плацента способна самостоятельно продуцировать достаточно эстрогенов и прогестерона, при участии которых эндометрий нормально функционирует независимо от секреции гормонов в желтом теле яичников. Тогда же концентрация ХГ в крови беременной женщины постепенно снижается, а желтое тело может функционировать без воздействия ХГ. В этот период роль гормона заключается в стимуляции производства тестостерона у плода, что необходимо для нормального развития наружных половых органов эмбриона.
Таким образом, в течение беременности уровень бета-ХГЧ в крови сначала нарастает и затем снижается. По этому показателю можно судить о благополучном течении беременности и выявлять нарушения развития плода. Тест на ХГ в крови – наиболее достоверный метод определения беременности на ранних сроках. ХГ появляется в организме женщины c 6-8-го дня после оплодотворения. Распространенный экспресс-тест на беременность, которым может воспользоваться каждая женщина в домашних условиях, тоже основан на измерении ХГ в моче.
Уровни гормона ниже нормы на различных этапах развития плода позволяют сделать предположение об эктопической беременности, задержке в развитии плода, угрозе самопроизвольного аборта, неразвивающейся беременности или недостаточности функции плаценты. Причиной повышенного содержания бета-ХГЧ может быть токсикоз, сахарный диабет или неправильно установленный срок беременности. Высокий уровень гормона после мини-аборта указывает на прогрессирующую беременность.
Определение уровня ХГ входит в тройной тест-исследование, по результатам которого можно судить о некоторых аномалиях развития плода, но точный диагноз поставить нельзя. Исследование лишь позволяет отнести женщину к группе риска по данной патологии. В этом случае необходимо дальнейшее обследование. У небеременных в норме ХГ отсутствует, однако он может секретироваться некоторыми аномальными тканями, происходящими из хориона (пузырным заносом, хорионэпителиомой), и некоторыми другими опухолями.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Неделя беременности (с момента зачатия)
Электрохемилюминесцентный иммуноанализ что это такое
В настоящее время представлено множество моделей автоматических анализаторов, отличающихся по методу, используемому для обнаружения искомого вещества. Основными используемыми методами анализа являются:
Рассмотрим подробней иммунохемилюминесцентный анализ.
Иммунохемилюминесцентный анализ основывается на иммуноферментном методе, принцип которого был разработан в 1971, как замена радиоиммунному анализу, который представлял опасность для здоровья сотрудников лаборатории, проводивших исследования.
Дальнейшее развитие систем анализа использующих ИФА, в том числе их повсеместная автоматизация, привели к появлению разновидностей ИФА, а именно иммунохемилюминесцентному анализу.
Иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) является лабораторным анализом, который сочетает хемилюминесценцию (электромагнитное излучение, вызванное химической реакцией с образованием света) с реакцией образования иммунного комплекса «антиген-антитело». Как и в случае с другими видами иммуноанализа (РИА, ИФА), в ИХЛА используются химические компоненты, которые могут генерировать световое излучение в результате химической реакции, например, меченные антитела. Таким образом, метод обладает высокой чувствительностью и позволяет обнаружить широкий спектр веществ белковой природы.
ИХЛА бывает двух типов качественный и количественный. В первом случае определяется наличие или отсутствие в анализируемом материале искомого компонента, во втором случает определяется найденная концентрация определяемого компонента в материале. Чаще всего используется количественный тип ИХЛА.
В лабораторной диагностике, с применением ИХЛА, основными видами исследуемых жидкостей организма являются цельная кровь, плазма, сыворотка, моча, спинномозговая жидкость, мазки с слизистых оболочек. Вид используемой в исследовании жидкости определяется используемой моделью анализатора и совместимыми наборами реагентов.
Основные плюсы метода:
— Безопасность для персонала, проводящего исследование;
— Широкий спектр применения;
— Относительная простота используемого оборудования;
— Широкий линейный диапазон.
Основные минусы:
— Дороговизна реагентов и оборудования;
— Интерпретацию результатов должен осуществлять специалист;
— Низкая восприимчивость к инфекционным заболеваниям (большинство используемых реагентов могут лишь косвенно указать на наличие инфекции)
— Лечащему персоналу необходимо знать, какой аналит должен быть найден, при назначении исследования.
В последние годы ИХЛА привлекает все большее внимание в различных областях, включая биологию, клиническую диагностику, мониторинг окружающей среды, безопасность пищевых продуктов и фармацевтический анализ.
Электрохемилюминесцентный иммуноанализ что это такое
ФГУ Эндокринологический научный центр, Москва
Современные методы гормонального анализа
Журнал: Проблемы эндокринологии. 2011;57(1): 86-91
Гончаров Н. П. Современные методы гормонального анализа. Проблемы эндокринологии. 2011;57(1):86-91.
Goncharov N P. Modern methods of hormonal analysis. Problemy Endokrinologii. 2011;57(1):86-91.
ФГУ Эндокринологический научный центр, Москва
Представлена характеристика основных методов определения гормонов, включая радиоиммунологические и иммуноферментные, а также подробно описаны современные методы иммуноанализа третьего поколения, обладающие высокой чувствительностью, что позволяет определять практически весь основной спектр гормонов и биологически активных соединений. Это открывает новые возможности в диагностике субклинических форм эндокринной патологии.
ФГУ Эндокринологический научный центр, Москва
Одним из определяющих достижений современной биологии и медицины является создание во второй половине ХХ века методов радиоиммунологического определения гормонов и других биологически активных соединений в различных средах и тканях организма, позволяющих адекватно оценить функциональное состояние эндокринной или любой другой физиологической системы.
Появление радиоиммунологических методов относится к 1960 г., когда две независимые группы исследователей (R. Yalow и S. Berson в США и R. Еkins в Великобритании) впервые описали метод определения инсулина и тироксина с помощью сатурационного анализа, основанного на принципе радиоиммуноанализа (РИА). В первом случае в качестве связывающего компонента были использованы антитела к инсулину, во втором — специфический транспортный белок к тироксину. Работа, посвященная РИА-методу определения инсулина, была удостоена Нобелевской премии.
Впоследствии были созданы и другие методы иммуноанализа. В отличие от ранее использовавшихся биологических и химических методов, иммунологические методы обладают значительными преимуществами.
Общие принципы иммуноанализа
Основополагающим компонентом любого метода иммуноанализа являются антитела — поликлональные и моноклональные, получаемые in vivo. Антитела, присутствующие в антисыворотке, обычно имеют молекулярную массу более 150 кД и принадлежат к классу иммуноглобулинов (Ig). Обычно в антисыворотке доминируют IgG, IgA и IgM. Варианты в структуре аминокислотных остатков Ig определяют различия в местах связывания антигена. Теоретически считается, что таких мест связывания может насчитываться до 1010.
Основной принцип иммуноанализа — это реакция антитела с антигеном. При взаимодействии антитела (Аb) и антигена (Ag) образуетcя комплекс (Аb:Аg) по формуле: Ab+Ag→Ab:Ag.
Для методов иммуноанализа биологически активных соединений необходимы следующие составляющие:
—высокоочищенный антиген для иммунизации;
— антисыворотка с высокоспецифичными антителами;
— высокоочищенный меченый антиген с максимально высокой специфической активностью;
— технология разделения свободного антигена от антигена, связанного с антителами.
Краткая характеристика основных компонентов иммуноанализа
Антитела
Необходимо всегда помнить, что при разработке любых методов иммуноанализа определяющую роль играет оптимальный выбор высокоспецифических антител независимо от системы регистрации сигнала используемого меченого компонента. Нередко в коммерческих наборах выбор антител не оптимален, что может приводить к диагностическим ошибкам.
Поликлональная антисыворотка содержит несколько тысяч различных типов молекул IgG. Принципиальное отличие моноклональных антител — их идентичность. Они предпочтительнее в методе конкурентного иммуноанализа, так как меченый и определяемый антиген (вещество) конкурируют за один и тот же центр связывания. Знание специфичности их эпитопов имеет существенное преимущество при создании «сандвич»-анализа. Моноклональные антитела легко получать в больших количествах с помощью гибридомной технологии, что обеспечивает возможность стандартизации метода и тем самым воспроизводимость полученных результатов в течение длительного отрезка времени. Применение моноклональных антител для иммуноанализа пептидных гормонов требует большой осторожности, так как их высокая специфичность может приводить к связыванию только одной изоформы того или иного гормона. Этот эффект может проявляться также при аффинной очистке пептидов.
Стандарты
Для пептидных и гликопротеиновых гормонов используются международные стандарты ВОЗ. Работу по их созданию и обновлению координирует отдел биологических стандартов Национального института медицинских исследований в Лондоне. Систематическая информация о стандартах публикуется в докладах ВОЗ. Высокоочищенные стандарты для низкомолекулярных соединений, например для стероидов, можно приобретать у коммерческих фирм или из международной коллекции стандартов стероидов в Национальном институте здоровья США.
Одной из причин несоответствия между стандартами является природная гетерогенность их молекулярной структуры, которая наблюдается в случае гликопротеиновых гормонов (тиреотропный гормон — ТТГ, лютеинизирующий гормон — ЛГ, фолликулостимулирующий гормон — ФСГ), а также пролактина (Прл) и гормона роста (ГР). Содержание изоформ гормонов и их соотношение изменяется в зависимости от источника и технологии получения гипофизарных гормонов. Другими причинами, влияющими на качество стандартов, могут быть процесс лиофилизации, а также условия и продолжительность их хранения.
Матрикс
Для разбавления стандарта часто используют сыворотки, буферные и белковые растворы. Состав этих растворов или «матриксов» может влиять на реакцию антиген–антитело, в результате чего возникают серьезные систематические ошибки, которые сопровождаются нарушением воспроизводимости результатов анализа. Это довольно распространенное в иммуноанализе явление обозначают «эффектом матрикса». Принцип сопоставимости анализов заключается в том, чтобы анализируемое вещество в пробе взаимодействовало в тех же условиях, что и в стандартном растворе. Матриксные эффекты чаще всего влияют на определение ТТГ, общих трийодтиронина — ТЗ, тироксина — Т4, Прл, ФСГ, ЛГ и стероидов, если они предварительно не выделены из пробы экстракцией.
Для диагностического мониторинга и проведения научных исследований используются следующие основные методы гормонального иммуноанализа: метод радиоиммунного анализа, иммуноферментный метод (ИФА), сверхчувствительные методы третьего поколения, основанные на измерении усиленного люминесцентного сигнала или регистрации вычлененного во времени флюоресцентного сигнала и электрохимический метод иммуноанализа с использованием высокопроизводительных автоматических анализаторов ряда зарубежных фирм.
Методы радиоиммуноанализа
Неотъемлемым компонентом радиоиммунологического метода является применение радиоактивной метки (трития — 3 Н I или 125 I) с высокой удельной активностью. Регистрация сигнала осуществляется с помощью специальных гамма- (для 125 I) или бета- (для 3 Н I) счетчиков.
Наряду с достоинствами, общими для всех иммунологических методов, РИА-методы имеют и ряд недостатков. К ним в первую очередь относится использование радиоактивного материала (3 Н I или 125 I). Для персонала лаборатории наличие в наборе радиоактивности не представляет опасности. Короткий период полураспада 125 I (4—5 нед) также ограничивает время использования РИА-наборов и тем самым снижает их диагностическую эффективность.
Неизотопные методы исследования
Создание 30 лет назад метода включения фермента в антитело или определяемый антиген обеспечило быстрое развитие иммуноферментных методов иммуноанализа. Наиболее широко в качестве меченого компонента используются пероксидаза хрена и щелочная фосфатаза.
Твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA). ELISA получил наиболее широкое распространение при определении гормонов в эндокринологии. В качестве твердофазных носителей наиболее широко используются полистироловые микропланшеты. В ELISA используются конъюгаты антител с ферментом, которые, реагируя с соответствующими «хромогенными» субстратами, образуют окрашенные соединения с определенными оптическими характеристиками. Этот метод более производителен по сравнению с классическими жидкофазными методами РИА и ИФА. Однако необходимо помнить о недостатках метода. В частности, высокую точность измерений могут обеспечить только специальные анализаторы. Кроме того, свойства и качество полистироловых микропланшет, используемых в ELISA, при недостаточно оптимальной технологии их производства могут изменяться от партии к партии и даже от лунки к лунке, что драматически влияет на качество и воспроизводимость гормонального анализа.
Высокочувствительные методы третьего поколения
Флюоресцентный иммуноанализ. Существует несколько разновидностей данного метода. В последние 30 лет большое распространение в гормональной диагностике получил иммуноанализ с флюоресценцией, отсроченной во времени (Delfia), где в качестве метки используется редкоземельный элемент европий. Это принципиально новый тип иммуноанализа. Дельфия позволяет определять стероидные гормоны в пикограммовых количествах, а гипофизарные — в концентрациях от 0,03 мЕд/л (для ТТГ) до 0,15 мЕд/л (для Прл). Дельфия является технологией выбора при проведении скрининга на врожденный гипотиреоз и ВДКН.
Люминесцентный иммуноанализ. Наиболее оптимальными методами иммуноанализа являются фотоэмиссионные или люминесцентные методы. Наибольшее применение в иммуноанализе получил метод с усилением люминесцентного свечения.
Метод усиленной люминесценции
Усиление реакции люминесценции достигается добавлением люминогенного субстрата, люминола или изолюминола и специального усилителя. Последний резко усиливает интенсивность и продолжительность свечения, что и обеспечивает высокую чувствительность и воспроизводимость метода. Световой сигнал регистрируется специальным анализатором (люминометры). Метод высокопроизводителен, обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Он наиболее оптимален при обследовании населения на гипотиреоз, так как позволяет определять свободный тироксин в концентрации 8 пмоль/л. Высокая чувствительность определения низкого уровня ТТГ ( 
Если при анализе результатов в качестве пограничного критерия норма/андрогенный дефицит использовать нижний предел референсных значений, то, по данным расчетного метода A. Vermeulen, сниженная концентрация свободного тестостерона определялась в 15% случаев; по результатам определения в слюне — в 18% случаев, при определении общего тестостерона в сыворотке и свободного тестостерона в сыворотке с предварительной ультрафильтрацией — в 20 и 38% случаев. Иными словами УФ-метод более чувствителен для диагностики андрогенного дефицита.
Постаналитический этап. Полученные результаты проверяются и анализируются высококвалифицированным сотрудником лаборатории и поступают к врачам клиники или поликлиники. По данным зарубежных авторов, до 30–40% назначений для выполнения гормональных анализов не имеют оснований и могут дезинформировать врача в постановке диагноза. Для исключения таких ошибок необходимо тесное ежедневное взаимодействие сотрудников лаборатории и клиники при обсуждении и трактовке полученных результатов.
Определяющие факторы при выборе метода анализа
Выбор метода анализа прежде всего зависит от аналитической характеристики метода. Основные из них следующие:
— чувствительность тест-системы, которая детерминирована аффинностью антител, а также технологической конструкцией системы и разрешающей способностью прибора при регистрации сигнала;
— диапазон определяемых концентраций соединений, который определяется калибровочной кривой;
— специфичность тест-системы, которая определяется процентом перекрестных реакций с близкородственными соединениями;
— степень линейности и процент открытия внесенного в пробу стандарта (она должна быть в пределах 90—104%);
— воспроизводимость получаемых результатов (допустимые значения — до 15% между постановками в разные дни);
— трудоемкость в проведении анализа;
— стоимость тест-системы (к сожалению, этот фактор часто доминирует). Как правило, низкая стоимость набора не может обеспечить необходимое качество, которое определяется сбалансированными вышеперечисленными параметрами.
В заключение необходимо отметить поступательное развитие эндокринологии как общебиологической науки за последние 50 лет. Успехи во многом определились достижениями в области фундаментальной науки — химии, физики и биологии. Ключевым моментом в развитии послужили работы о гуморальной природе передачи нервного сигнала и открытие биологическими методами активных соединений, выделяемых эндокринными железами. Ученые в разных странах буквально начали «атаку» по расшифровке их химической структуры. На этом этапе большую роль сыграли физико-химические методы в комбинации с биологическим тестированием выделенных гормонов. Параллельно шли работы по их синтезу, которые увенчались созданием целого ряда гормональных препаратов, обеспечивающих прогресс в клинической эндокринологии. Дальнейший прорыв в развитии эндокринологии обеспечило открытие в 1960 г. метода гормонального иммуноанализа, который обеспечил новые возможности определения гормонов в различных биологических средах в пикограммовых количествах, недоступные для классических физико-химических методов. Параллельно шло создание и развитие методологии и технологии методов молекулярной эндокринологии с генетикой, которые позволили расшифровать взаимодействие рецепторного аппарата тканей-мишеней с гормоном, идентифицировать генетический контроль этого ключевого процесса, а также установить структуру многих рецепторов и контролирующих генов. Появление более чувствительных методов определения гормонов и их широкая доступность открыли новые возможности в диагностике субклинических форм эндокринной патологии. Однако всегда необходимо помнить неизменное правило — окончательный диагноз определяется клиническими параметрами болезни, опытом и знаниями лечащего врача, а все используемые методы важны, но они имеют вспомогательный характер.
Новые методы диагностики COVID-19
Поведение нового коронавируса, который вызывает COVID-19, изучают ученые по всему миру. Совершенствуются методы диагностики, направленные на выявление в организме SARS-CoV-2. В конце 2020 года на рынке лабораторных исследований были представлены более 300 разных тестов:
ПЦР и антиген-тесты позволяют обнаруживать частички коронавируса в организме на момент проведения исследования и указывают на то, что человек может быть потенциальным источником заражения окружающих. Серологические тесты на определение антител (иммуноглобулинов) показывают наличие иммунного ответа организма при встрече с вирусом.
ДИЛА одной из первых частных лабораторий Украины начала тестирование на COVID-19 методом ПЦР и имеет уникальный для Украины экспертный опыт, приобретенный на базе 241 184* проведенных тестов!
Одной из последних разработок стали тесты на определение специфических антигенов вируса SARS-CoV-2. У них есть как преимущества, так и недостатки: они более доступны и результат можно получить прямо на месте тестирования в течение 20 минут. Однако чувствительность этих тестов ниже по сравнению с ПЦР, потому как результат теста на АГ, как правило, напрямую зависит от вирусной нагрузки. Антиген-тесты в мазке из носо-, ротоглотки выявляют белки коронавируса SARS-CoV-2, которые синтезируются в ходе репликации и результат также очень зависим от качества и места взятия материала. На сегодня многие компании по всему миру заняты разработкой тестов для выявления антигенов коронавируса SARS-CoV-2. Однако это исследование имеет свои особенности и ограничения применения. Какие именно, расскажут эксперты ДИЛА.
*данные Центра общественного здоровья МОЗУ состоянием на 01.02.2021 г.
В чем заключаются отличия метода ПЦР и антиген-теста
Метод ПЦР – золотой стандарт диагностики, регламентированный Министерством здравоохранения Украины и рекомендованный Всемирной организацией здравоохранения для установления наличия/отсутствия возбудителя коронавирусной болезни.
ДИЛА предлагает выбор ПЦР исследований в зависимости от необходимости срока получения результата:
Когда показан ПЦР тест:
Современные возможности ПЦР диагностики позволяют ответить на вопрос: присутствует или нет вирус в данном мазке, а также определить вирусную нагрузку (ВН): как много вирусных частиц в 1 мл исследуемого материала (может быть высокая, средняя, низкая). От показателя ВН напрямую зависит контагиозность (заразность) инфицированного человека для окружающих.
Материалом для ПЦР исследования на определение COVID 19 может служить мокрота, смывы с бронхов, кал
Как определяется ВН и ЧТО означает показатель Сt**.
Для условного определения ВН используют показатель «пороговый цикл», обозначенный в результате анализа как Сt (Сycle threshold). Он показывает, сколько циклов амплификации произошло для достижения порога обнаружения вирусной РНК в образце. С каждым циклом количество копий РНК удваивается. Чем больше вирусных частичек в образце, тем быстрее их выявит тест-система и тем ниже будет показатель Ct.
Обычно ПЦР в реальном времени происходит в течение 40 циклов. После каждого цикла оценивают наличия свечения (флюоресценции), которое исходит от меченых фрагментов РНК возбудителя.
Тест для определения антигена SARS-CoV-2 основан на выявлении в биоматериале специфического белка, который принадлежит нуклеокапсиду коронавируса
Для исследования используется материал тот же, что и в большинстве случаев для проведения ПЦР – соскоб из носо- и ротоглотки. Большим плюсом является то, что результат можно получить на месте уже через 20 минут. Также положительным моментом служит его стоимость – экспресс-тесты более доступны, так как для проведения тестирования не требуется дорогостоящее оборудование, квалифицированный персонал, современные лаборатории.
Тест на антиген способен выявить присутствие COVID-19 в том случае, когда вирусная нагрузка высокая, т.е. в носоглотке находятся сотни тысяч и миллионы копий вируса, что чаще бывает в начале заболевания или в период разгара коронавирусной болезни. При средней или низкой вирусной нагрузке тест может дать ложноотрицательный результат.
В основном экспресс тесты предназначены для «быстрого реагирования»:
Положительный результат теста на антиген при наличии симптомов заболевания свидетельствует о том, что человек болен COVID-19. Однако если результат теста положительный, а проявления отсутствуют, необходимо в течение ближайших двух дней провести ПЦР тест для подтверждения полученных результатов теста на антиген.
Отрицательный тест на антиген не исключает наличие COVID-19:
В данном случае для подтверждения антиген-теста используется ПЦР.
Также данный вид тестирования не рекомендуется для проведения лицам с подозрительным и вероятным случаем COVID-19 без клинических проявлений, у которых количество вирусов в носоглотке может быть небольшим и быстрый АГ тест не сможет их выявить.
Отрицательный тест на антиген не является заключением о выздоровлении после коронавирусной болезни, разрешительным документом для досрочного снятия с самоизоляции в сервисе «Дій вдома» в случае прибытия из стран «красной зоны». В этих случаях также требуется результат ПЦР.
Иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) – методика выявления антител (иммуноглобулинов) IgM и IgG к коронавирусу. В ДИЛА проводится определение:
ИХЛА позволяет подтвердить или исключить факт встречи с вирусом SARS-COV-2 и оценить наличие иммунного ответа к нему. Метод направлен на полуколичественное обнаружение антител, которые указывают на то, что человек сейчас болен COVID-19 (IgM) или переболел ранее к SARS-COV-2 (IgG), а также дает возможность оценить иммунный ответ в динамике.
ИХЛА – метод серологической диагностики, обладающий весомыми преимуществами по сравнению с методом ИФА (иммуноферментный анализ):
ИХЛА исследования показаны:
Суммарное определение антител повышает диагностическую ценность исследования и позволяет определить комбинацию иммуноглобулинов в ходе одного исследования, не привязываясь ко времени инфицирования. Также, в ближайшем будущем благодаря исследованию вы сможете:
Иммуноглобулины (антитела) каждого класса появляются, а затем снижаются ниже порога обнаружения в определенный отрезок времени, который зависит от индивидуальных особенностей организма. Например, антитела могут начать вырабатываться гораздо позже, или если антитела класса М уже снизились ниже порога определения, то прибор определит антитела класса G, и наоборот. В таком случае определение суммарных антител имеет значительные преимущества по сравнению с обнаружением IgG и IgM по отдельности за счет большего временного диапазона определения иммунного ответа и позволяет перекрыть «серологические окна», что значительно повышает чувствительность тест-систем.
Как используются тесты для диагностики COVID-19
Разные тесты служат для разных целей
Исследование на антитела lgM позволяет:
Исследование на антитела lgG позволяет:
Они направлены на прямое определение антигена (нуклеокапсидного белка) SARS-CoV-2 иммунохроматографическим методом в образцах соскобов из носоглотки человека, что позволяет с высокой вероятностью предположить инфицирования вирусом (SARS-CoV-2).
Исследование методом ПЦР позволяет:
Диагностический экспресс-тест – скрининговое исследование, оправданное в условиях ограниченной доступности ПЦР, а также когда продолжительность ожидания результата ПЦР-исследования исключает его клиническую эффективность. Он позволяет непосредственно на месте получить качественную оценку касательно заражения. Поэтому экспресс-тесты уместны, если результаты нужно получить максимально быстро у лиц с подозрительным и вероятным случаем COVID-19. Кроме того, исследование методом полимеразной цепной реакции требуется во всех официальных случаях: при выезде за границу, возвращении из стран с высоким уровнем распространением инфекции с целью досрочного прекращения самоизоляции. Во всех этих случаях в качестве подтверждения отсутствия инфекции SARS-CoV-2 рассматриваются исключительно результаты ПЦР.
Быстрый тест на антиген можно сдать в отдельных отделениях, предварительно заполнив Анкету-направление на сайте